ישן

איזו משיטות הכימות מתאימה במיוחד לבדיקה של דוגמה מרובת חלבונים ללא צורך בריצוף?

done

איזו משיטות הכימות מתאימה במיוחד לבדיקה של דוגמה מרובת חלבונים ללא צורך בריצוף?

done
למה לא השיטות האחרות: כימות לפי חומצות אמינו – כימות מדויק מאוד, אבל לרוב מתאים לדוגמה טהורה של חלבון אחד, ודורש הידרוליזה; לא מתאים לתערובת. ELISA סנדוויץ’ – מאוד רגיש וספציפי, אבל מתאים רק לזיהוי חלבון אחד ספציפי ולא תערובת. BCA – שיטה כוללת לכימות חלבון כולל, אבל לא מבחינה בין סוגים שונים של חלבונים.
נערך  Jul 19 '25 - 11:29

איזו משיטות הכימות מתאימה במיוחד לבדיקה של דוגמה מרובת חלבונים ללא צורך בריצוף?

done
BCA (Bicinchoninic Acid Assay): זוהי שיטה קולורימטרית נפוצה ויעילה לכימות חלבונים כולל בדוגמאות מרובות חלבונים. היא מבוססת על תגובה של יוני נחושת (Cu$^{2+})עםקשריפפטידבחלבונים(ת גובהביוּרֵט),ולאחרמכןתגובהשליוניהנחושת: המחוזרים(Cu^{+}$) עם חומצה ביקונינכונינית (BCA), אשר יוצרת תוצר סגול הניתן לכימות ספקטרופוטומטרית. היתרון הגדול של שיטה זו הוא שהיא אינה דורשת ידע ספציפי על רצף החלבונים בדוגמה. כימות לפי חומצות אמינו: שיטה זו אכן יכולה לספק מידע כמותי מדויק מאעל חלבודנים, אבלך היא לדורשת הידרוליזה של החלבונים לחומצות אמיםנו ולאחר מכן הפרדה וגכימהות של טחומצות האמינו. למרות שהיא אינה דורשת ריצוף "ישיר" של החלבוןנים, היאח עד,יין ודתהליך מורשכב הידותר ופחות "כלליזה"; לאכימות כולל של חלבונים בדוגמה מרובתא חלבונים מבלי לדעתע מראש אילו חלבתונים קיימים. אלייזה בשיטת סנדוויץ' (Sandwich ELISA): סנדוושיץ’ –טה מאזוד רגהישא וספציפי,ת אבליותר ומתאים רקועדת לזיהוי וכימות של חלבון איחיד וספציפי בתולאך תערובת מורכבת. היא דורשת נוגדנים BCAספציפיים לחלבון שיהמטרה כוללכן אינה מתאימה לכימות כללי של "דוגמה מרובת חלבוןנים" כוללא צורך בריצוף, אבלא לאם כן רוצים לכמבת חינה לביון מסוגים שמאונד מתוך התערובת. היא דורשת ידע מוקדם שעל החלבון שאותו רוצים לכמת וזמינות של נוגדנים מתאימים.
נערך  Jul 20 '25 - 09:51
visibility   חדש

* השאלה נוספה בתאריך: 08-07-2025