במה שונה ELISpot מ־Flow Cytometry לזיהוי תאים מפרישים?

הסבר: ELISpot (Enzyme-Linked ImmunoSpot) מזהה תאים בודדים שמפרישים חלבונים (למשל ציטוקינים) על ידי קליטת החלבון המופרש על גבי ממברנה – כל כתם מייצג תא אחד מפריש. זוהי שיטה מאוד רגישה וכמותית לפעילות תאית. Flow Cytometry משמשת בעיקר לניתוח חלבונים תוך-תאיים או סמני פני שטח של תאים, באמצעות נוגדנים פלואורסצנטיים. כאשר רוצים לבדוק ציטוקינים, יש צורך לבצע תיקנון תוך תאי (permeabilization) כדי לזהות את החלבון בתוך התא, לפני שיצא ממנו. ❌ למה שאר התשובות שגויות: Flow Cytometry מזהה תאים לפי רמת DNA – לא נכון, השיטה מזהה חלבונים וסמני תא, לא DNA, אלא אם משתמשים בצביעת DNA מיוחדת (כמו PI), וזה לא רלוונטי כאן. ELISpot מזהה תאים נעים, Flow מזהה תאים קבועים – לא מדויק ואפילו הפוך לעיתים: ב-ELISpot התאים דווקא מקובעים בבארית, וב-Flow הם זורמים. אין הבדל – שתיהן שיטות מבוססות אנטיגן־נוגדן לזיהוי ציטוקינים – אמנם שתיהן משתמשות בנוגדנים, אבל ההבדל משמעותי מאוד בסוג המידע שהן מספקות: מיקום החלבון (מופרש vs תוך תאי), מספר תאים פעילים, ויכולת כימות.